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【文献分享】抗核抗体荧光核型在原发性胆汁性胆管炎和自身免疫性肝炎筛查中的作用评估
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【文献分享】抗核抗体荧光核型在原发性胆汁性胆管炎和自身免疫性肝炎筛查中的作用评估

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  • 来源:
  • 发布时间:2024-12-30
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【概要描述】抗核抗体荧光核型在原发性胆汁性胆管炎和自身免疫性肝炎筛查中的作用评估

【文献分享】抗核抗体荧光核型在原发性胆汁性胆管炎和自身免疫性肝炎筛查中的作用评估

【概要描述】抗核抗体荧光核型在原发性胆汁性胆管炎和自身免疫性肝炎筛查中的作用评估

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 抗核抗体(ANA),又称抗细胞抗体,是包括针对真核细胞内各种抗原成分的自身抗体总称,其对自身免疫病具有较高的诊断敏感性。研究通过分析原发性胆汁性胆管炎(PBC)和自身免疫性肝炎(AIH)患者ANA荧光核型的检出情况,评估Hep-2 IFA在PBC和AIH患者疾病筛查中的意义及相关核型与特异性自身抗体检出率的相关性。

01

研究对象

    选取上海交通大学医学院附属仁济医院2019年4月-12月进行自身免疫性肝病筛查试验并明确诊断为PBC和AIH的患者:PBC患者106 例,年龄(53.3±11.4)岁,其中女性92例(86.8%),男性14例(13.2%);AIH患者138例,年龄(52.1±12.8)岁,其中女性120例(87.0%),男性18例(13.0%)。

0

2

方法

    用IFA法检测血清ANA、抗线粒体抗体(AMA)和抗平滑肌抗体(ASMA),ANA荧光核型判读依据ICAP所定义的30种荧光核型(AC-0~AC-29)。用免疫印迹法检测ALD相关特异性抗体,特异性抗体谱包括:线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)、肝溶质抗原1型(LC-1)抗体、肝肾微粒体抗体(LKM-1)、2-丙酮酸脱氢酶(M2-3E)抗体、早幼粒细胞白血病蛋白(PML)抗体、Ro52抗体、可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗体、斑点蛋白(Sp100)抗体和糖蛋白210(gp210)抗体,结果判定依据试剂说明书。用酶联免疫法检测抗F-肌动蛋白抗体。

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3

统计方法

    用SPSS 22.0、GraphPad Prism 5.01软件进行。计数数据用例数(n)、百分率(%)进行描述,皮尔森卡方检验或Fisher确切概率法分析;正态分布计量数据用均数±标准差(x̄±s)表示, 用t检验分析。以 P<0.05为差异有统计学意义。

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4

结果

 ANA检出率及主要核型分析

    PBC和AIH患者ANA检出率分别为91.5%(97/106)和68.8%(95/138)。PBC患者中单一核型占37.7%(40/106),混合核型占53.8%(57/106)。单一核型中,检出率前三位是胞浆网状/线粒体样型(AC-21)[13.2%(14/106)]、粗颗粒型(AC-5)[4.7%(5/106)]以及均质型(AC-1)、细颗粒型(AC-4)、点状核膜型(AC-12)[均为3.8%(4/106)];混合核型检出率最高的为着丝点型(AC-3)合并AC-21[13.2%(14/106)]。AIH患者中单一核型占43.5%(60/138),混合核型占25.4%(35/138)。单一核型中,检出率最高的是细颗粒型(AC-4)[14.5%(20/138)];混合核型检出率最高的为AC-12合并AC-21[8.0%(11/138)]。PBC和AIH患者不同单一核型中的检出率见表1。荧光核型在PBC和AIH患者中检出率(包括在单一核型和复合核型中出现情况)见图1。

胞浆网状/线粒体样型和胞浆颗粒型与AMA

点状核膜型与抗gp210抗体

胞浆纤维型与ASMA和抗F-肌动蛋白抗体

  本研究中,PBC患者ANA检出率91.5%,且阳性样本中大部分为混合核型,而AIH患者ANA检出率仅68.8%,阳性样本中以单一核型为主。另外,AC-21核型是PBC患者中最常见的核型,且在AIH患者中也有18.1%的检出率, 而其他胞浆颗粒型(包括AC-18/19/20)检出率仅0~3.8%。在PBC患者中AC-21荧光核型血清中AMA(IFA法)、AMA-M2和M2-3E检出率分别为90.7%、87.0%和94.4%,明显高于胞浆颗粒型AMA检出率(25.0%)和其他荧光核型(除外AC-18/19/20/21)AMA检出率(15.8%~36.8%)。因此,实验室对AC-21核型的准确判读,对后续进行AMA抗体检测具有重要提示作用。临床实验室应将该核型作为实验室必报荧光核型,并与其他胞浆颗粒型(包括AC-18/19/20)进行区分。核膜型在ICAP定义中分为光滑核膜型(AC-11)和点状核膜型(AC-12),两者对应靶抗原不同。前者主要靶抗原为核纤层蛋白,临床尚无商品化检测试剂盒,可于健康人中检出且无疾病特异性;后者主要靶抗原为抗核孔复合体抗体,如gp210、nup62和Tpr,其中抗gp210抗体是PBC患者特异性诊断标志,可在9.4%~41.2%的PBC患者中检出,而健康人群和其他疾病人群中检出率仅0~0.4%。本研究中,AC-12 在PBC患者中检出率24.5%,位居第二,且未检出光滑核膜型(AC-11);PBC患者中AC-12样本抗gp210抗体检出率高达95.2%,而非核膜型抗gp210抗体检出率仅21.1%。因此,准确识别AC-12核型,对于后续PBC相关抗体检测具有重要意义。但由于Hep-2间期细胞核通常呈细颗粒样染色,AC-12易误判为核颗粒型;另外胞浆网状/线粒体样型荧光核型也会对核膜型的判读造成干扰。此时,以猴肝细胞为基质的荧光片可以辅助判读,通常情况下核膜型可在猴肝细胞核外圈有明显核膜染色。核多点型(AC-6)对应的靶抗原主要为Sp100和PML,两者常共同检出于PBC患者;核少点型(AC-7)对应的靶抗原主要为p80-螺旋蛋白,其对于对任何疾病的阳性预测值都较低。本研究中,AC-6在PBC患者中检出率为10.4%,位居第五,且AC-6阳性样本中抗Sp100抗体检出率为90.9%,而AC-7 中该抗体检出率仅25.0%。抗Sp100抗体对PBC诊断敏感性虽较低(20%-40%),但特异性高(>95%),并且在AMA阴性PBC患者的诊断具有重要价值。因此,临床实验室判读核点型时,区分核多点与核少点对于ALD筛查具有重要意义。本研究中,PBC患者中并未检出AC-15,而AIH患者中AC-15检出率仅1.5%。2例AC-15样本中,1例ASMA阳性,2例抗F-肌动蛋白抗体均阳性,因此AC-15核型对ASMA有一定相关性。临床实验室对ALD筛查人群进行ANA核型判读时,尤其需重视胞浆网状/线粒体样型、点状核膜型、核多点型和胞浆线性/肌动蛋白型荧光核型,并在报告中给予必要的临床建议。

 

(本文仅供参考学习使用)

 

参考文献:

[1]王之青,郑冰.抗核抗体荧光核型在原发性胆汁性胆管炎和自身免疫性肝炎筛查中的作用评估[J].临床检验杂志, 2021, 39(10):6.DOI:10.13602/j.cnki.jcls.2021.10.07.

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